1. 產(chǎn)品分類
      您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 關(guān)于細(xì)胞傳代的操作
      關(guān)于細(xì)胞傳代的操作
    2. 發(fā)布日期:2020-04-14      瀏覽次數(shù):1107
      • 1.細(xì)胞吸除培育瓶?jī)?nèi)舊培育液。

         

        2.參加無(wú)菌pbs洗液(5-8mL)悄悄潤(rùn)濕細(xì)胞,稀釋多余的培育基,之后吸走洗液,動(dòng)作要輕,不可吹打到細(xì)胞。

         

        3.向瓶?jī)?nèi)參加含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少許,以能覆滿瓶底為限。 

         

        4.置溫箱中2~5分鐘,一旦鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,細(xì)胞變圓,比較松動(dòng)后,當(dāng)即終止消化。
        ?

        5.參加該細(xì)胞對(duì)應(yīng)的培育基6mL(T25培育瓶)或12mL(T75培育瓶)終止消化。

         

        6.用吸管通過(guò)吸取的培育基悄悄反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)應(yīng)盡量以少的次數(shù)將細(xì)胞從壁上吹下,不只要操控吹打的力度、次數(shù),還要留意要將細(xì)胞盡可能吹成單個(gè)。這樣既能削減死細(xì)胞,又能便于細(xì)胞再次均勻貼壁成長(zhǎng)。

         

        7.依據(jù)傳代份額,將細(xì)胞懸液分瓶,再補(bǔ)充培育基后,靜置于溫箱培育,直止貼壁。

         

        貼壁細(xì)胞在培育瓶長(zhǎng)成致密單層后,持續(xù)成長(zhǎng)的空間缺乏,培育基中的養(yǎng)分成份也耗費(fèi)較多,同時(shí)代謝廢物也有較多堆積,需要分瓶培育,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代擴(kuò)增。關(guān)于貼壁不太緊的細(xì)胞如293,能夠直接吹散后分瓶。而關(guān)于貼壁較緊的細(xì)胞如CHO,則需要以胰酶消化后再吹散分瓶。

         

        關(guān)于懸浮細(xì)胞換液時(shí)只需要補(bǔ)液就行。

         

        懸浮細(xì)胞的傳代則不需要用胰酶消化,直接通過(guò)計(jì)數(shù)算好傳代的份額,直接分瓶,補(bǔ)液。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)成長(zhǎng),此刻細(xì)胞成長(zhǎng)狀態(tài)杰出,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),防止吹打。

      主站蜘蛛池模板: 鲁大师在线影院免费观看 | 亚洲人成人无码.www石榴| 日本亚洲欧洲免费天堂午夜看片女人员| 免费A级毛片无码A∨男男| 亚洲精品中文字幕| 国产免费黄色大片| 无人视频免费观看免费视频 | 无码人妻AV免费一区二区三区| 亚洲AV无码一区二区二三区入口| 中文在线免费观看| 亚洲国产成人一区二区三区| 久久这里只精品热免费99| 亚洲男人都懂得羞羞网站| 1000部夫妻午夜免费| 91亚洲自偷在线观看国产馆| 手机在线毛片免费播放| 国产精品观看在线亚洲人成网| 亚洲?V无码成人精品区日韩| 国产免费一级高清淫曰本片| 亚洲不卡av不卡一区二区| 亚洲视频免费在线看| 亚洲熟妇自偷自拍另欧美| 无码国产亚洲日韩国精品视频一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜免费视频 | 色欲国产麻豆一精品一AV一免费| 亚洲成无码人在线观看| 日韩免费无码一区二区视频| 一区二区三区视频免费| 久久亚洲精品成人| 日韩一区二区a片免费观看| 免费无码国产V片在线观看| 久久国产亚洲精品麻豆| 免费看美女裸露无档网站| 美女18毛片免费视频| 亚洲一区精品中文字幕| 日本人的色道www免费一区| aa级毛片毛片免费观看久| 亚洲噜噜噜噜噜影院在线播放| 亚洲av成人一区二区三区在线观看| 无码国产精品一区二区免费模式| 亚洲人成色在线观看|